1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
Aurora A+B+C有絲分裂激酶A/B/C抗體
phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
phospho-arfaptin 2 (Ser260)磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體
Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198)磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體
phospho-Acinus (Ser1180)磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體
phospho-ADRB2 (Ser346)磷酸化腎上腺素能受體β2抗體
APSAPS抗體
ACVRL1激活素受體樣激酶1抗體
ACVR1B激活素A受體1B抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser597)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-A Raf (Ser214)磷酸化A-Raf抗體
ASAH2酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體
ASAM脂肪細胞特異性粘附分子抗體
AAV5 capsid VP2 protein腺相關病毒5抗體
AMPK gamma 3腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體
AMPK beta 2腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體
phospho-APC1 (Ser355)磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體
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