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探針法PCR檢測試劑盒,你的了解有多少呢?小編來帶你了解一下
本試劑盒采用探針法實時熒光PCR技術(shù),設(shè)計一對EB病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR技術(shù)對EB病毒的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對病原學(xué)輔助診斷。
1DNA提取
1)對上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液(固體標(biāo)本加入50μL核酸提取液),100℃恒溫處理10min,13,000rpm離心5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5mLEP管,-20℃保存;
2)DNA的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行操作。
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2.探針法PCR檢測試劑盒檢測方法的局限性
a.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
b.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
c.陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
d.病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
f.試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;
g.本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
結(jié)果判斷
陽性:檢測通道Ct值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
可疑:檢測通道Ct值>35.0,且出現(xiàn)典型擴增曲線的樣本建議重復(fù)試驗,重復(fù)試驗結(jié)果出現(xiàn)Ct值≤35.0和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。
陰性:樣本檢測結(jié)果無Ct值且無明顯的擴增曲線。