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簡要描述:自養(yǎng)無枝酸菌PCR檢測試劑盒價格上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:化矢素 CAS 528-58-5 * 規(guī)格: 5mg杠柳苷 CAS 13137-64-9 * 規(guī)格: 20mgN-野靛堿 CAS 486-86-2 * 規(guī)格: 20mg紫云英苷 CAS 480-10-4 * 規(guī)格: 20mg甘草素 CAS 578-86-9 * 規(guī)格: 20mg
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
自養(yǎng)無枝酸菌PCR檢測試劑盒價格 | Amycolata autotrophicaPCR | BK-P8786 |
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人參皂苷Rh1 CAS 63223-86-9 * 規(guī)格: 20mg
梓醇 CAS 2415-24-9 * 規(guī)格: 20mg
藥根堿 CAS 3621-38-3 * 規(guī)格: 20mg
異香蘭素 CAS 621-59-0 * 規(guī)格: 20mg
塔拉薩敏 CAS * 規(guī)格: 20mg
麝香 CAS 541-91-3 * 規(guī)格: 20mg
(S型)人參皂苷Rg2 CAS 52286-74-5 * 規(guī)格: 20mg
青藤堿 CAS 115-53-7 * 規(guī)格: 20mg
蔓荊子黃素 CAS 479-91-4 * 規(guī)格: 20mg
化矢素 CAS 528-58-5 * 規(guī)格: 5mg
杠柳苷 CAS 13137-64-9 * 規(guī)格: 20mg
N-野靛堿 CAS 486-86-2 * 規(guī)格: 20mg
紫云英苷 CAS 480-10-4 * 規(guī)格: 20mg
甘草素 CAS 578-86-9 * 規(guī)格: 20mg
天然辣椒素(98%) CAS 404-86-4 * 規(guī)格: 20mg
自養(yǎng)無枝酸菌PCR檢測試劑盒價格醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白 Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)
巖藻糖苷酶αL1(FUCα1)重組蛋白 Recombinant Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)
HCC1937(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
EJ(人膀胱細胞)5×106cells/瓶×2
SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人小細胞肺細胞 NCI-H209
小鼠白血病細胞G-CSF依賴性 NFS-60
酸菌液體培養(yǎng)基/Lactobacillus Fluid Medium250克國產(chǎn)/進口
堿性膽鹽瓊脂/AB瓊脂/Alealine Bile Salt Agar分離霍亂弧菌250克國產(chǎn)/進口
Raka-Ray培養(yǎng)基/酸菌選擇性培養(yǎng)基/Raka-Ray Medium啤酒中酸菌檢測和分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基100mL
血平板 規(guī)格: 90mm×20個 用途: 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-2010,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2...
克氏雙糖鐵瓊脂 規(guī)格: 250g 用途: 用于鑒別腸道菌發(fā)酵葡萄糖和糖,及產(chǎn)生硫化氫的生化反應(yīng)。(ISO)
半糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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