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簡(jiǎn)要描述:果膠裂解酶測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:R2A瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)R-2A Agar250克飲用水中導(dǎo)生細(xì)菌分離培養(yǎng)A1進(jìn)口、國產(chǎn)A1 Medium250克檢測(cè)水中的大腸菌群酵母提取物瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Yeast Extract Agar250克水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)乳糖蛋白胨肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)Lactose Peptone Broth250克飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗(yàn)
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商品介紹:
測(cè)定意義: 果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,是一種能降解植物細(xì)胞壁,導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來源比較廣泛,主要來源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的純化,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。 測(cè)定原理: 果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿、恒溫水浴鍋。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
果膠裂解酶測(cè)試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S7015 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
250mL Sodium Chloride Solution(氯化鈉溶液),0.9% Sodium Chloride Solution,0.9% 常溫保存
1 管 0F’大腸桿菌 0F’E.coli Strain -80℃保存
1個(gè) 雜交管(35×200mm) Hybridization Tube 常溫
250次 真菌RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存
2 ug pCI-neo pCI-neo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
LG (Linden Grain Medium) 250g
5g 油紅 O Oil Red O 室溫干燥保存
50T 犬鉤端螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
25 mg Monobromobimane [mBBR] Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
50mL EGTA Solution(EGTA溶液),0.5M,pH8.0 EGTA Solution,0.5M,pH8.0 常溫保存
25g 電泳級(jí)甲叉雙丙烯酰胺 Bis-Acrylamide,EG 常溫,防潮
果膠裂解酶測(cè)試盒微量法CYFIP2 細(xì)胞質(zhì)脆性X智力低下蛋白結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin alpha 5/CD49e/ITGA5 整合素α5抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK1/MAP2K1(Thr386) 磷酸化絲裂原活化蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
NGALR/Slc22A17 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體 規(guī)格: 0.1ml
RGAG4 RGAG4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接NEDD4-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC28A 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 規(guī)格: 0.2ml
DRAK1/STK17A 絲/蘇蛋白激17A抗體(DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激1) 規(guī)格: 0.2ml
HBsAg 人乙肝表面抗原抗體(包被) 規(guī)格: 0.1ml
RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 規(guī)格: 0.2ml
MTLC 致基因抗體 規(guī)格: 0.2ml
NUP88 核孔復(fù)合體蛋白88抗體 規(guī)格: 0.2ml
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