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簡要描述:土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:Half –Fraser 添加劑進口、國產(chǎn)Half-Fraser Supplement添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)5ml*2改良緩沖蛋白胨水(MBP)進口、國產(chǎn)Modified Buffered Peptone Water用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)250EB增菌液進口、國產(chǎn)EB Enrichment Broth用于單
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實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6864
產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:
測定意義: 木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應用潛力。 測定原理 木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,在310nm處有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
250mL MES Buffer,1.0M,pH5.5 MES Buffer,1.0M,pH5.5 常溫保存
100次 植物種屬鑒定PCR Mix 1(細胞核ITS) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMSCV-neo pMSCV-neo 低溫運輸,-20℃保存
5mL dNTP溶液,100 mM dNTP Solution,100 mM -20℃保存
1瓶 RBL-2H3細胞株 RBL-2H3 低溫運輸和保存
40%膽汁肉湯 40%Bile Broth 100g
5mg 環(huán) A Cyclosporin A 4℃保存
50T 產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
30次 一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝 (適合2-30 kD蛋白) One-Stop Stable SDS-PAGE Pack 4℃保存(上樣緩沖液需要-20℃保存)
2 ug pYCP211 pYCP211 低溫運輸,-20℃保存
50次 細菌DNAout Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存)
土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒微量法ALDH1A1 胞質(zhì)乙醛脫1抗體 規(guī)格: 0.2ml
DC-SIGN/CD209 細胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-ELk1(Thr417) 磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格: 0.1ml
BMP6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml
NCOA2 類固醇受體激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlGREB1 雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體 規(guī)格: 0.1ml
C1ORF111 1號染色體開放閱讀框111抗體 規(guī)格: 0.2mlATXN1/Ataxin-1 脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
HP1 alpha 異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α)抗體 規(guī)格: 0.1mlIntegrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlDMTF1 周期素D相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
ERdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlG alpha gust Gα gust抗體 規(guī)格: 0.2ml
TSPAN1 四分子交聯(lián)體1抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2mlPCDHA10/CNRN8 鈣粘蛋白相關神經(jīng)受體8抗體 規(guī)格: 0.2ml
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