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α半乳糖苷酶(αGAL)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:α半乳糖苷酶(αGAL)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:1%NaCl甘露糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 氨基酸脫羧對(duì)照 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 1%NaCl蔗糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 鳥(niǎo)脫羧肉湯 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-25
  • 訪  問(wèn)  量:473

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

α半乳糖苷酶(αGAL)測(cè)試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6747

商品介紹:

測(cè)定意義:

α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對(duì)于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過(guò)糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來(lái)源,后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。

測(cè)定原理:

α-GAL分解對(duì)-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GAL活性。

自備用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

100mL 三 TFA(Trifluoroacetic Acid) 室溫保存

Fraser(FB2)添加劑 Fraser Supplement 5ml*2

1 管 JM101大腸桿菌 JM101 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRSV-rev pRSV-rev 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL 冷凍型血液RNA保存液  常溫

2 ug pcDNA3.1/Myc-His C pcDNA3.1/Myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

YM培養(yǎng)基 YM Medium 250g

500mL 甲醇 Methanol 室溫密封保存

50T 牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR)  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1 mg BCECF AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

BETA-SSA瓊脂 BETA-SSA Agar 250g

α半乳糖苷酶(αGAL)測(cè)試盒微量法Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Bio  標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlDOK3  對(duì)接蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

LRFN2/SALM1  神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體 規(guī)格: 0.2mlTHAP1  核凋亡因子THAP1抗體 規(guī)格: 0.2ml

NUDEL/NDEL1  中心粒蛋白Nudel抗體 規(guī)格: 0.2mlPDIA2/PDI  蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體 規(guī)格: 0.2ml

PGRMC  孕激素受體膜相關(guān)元件抗體 規(guī)格: 0.2mlSCN10A/NAV1.8  鈉通道蛋白10α抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD158e  NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml

C10orf93  10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93抗體 規(guī)格: 0.2mlCAMK2D/CaMKII delta  鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2D(CaMKIIδ) 規(guī)格: 0.2ml

EME1  減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體 規(guī)格: 0.2mlCDC123/C10orf7  細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體 規(guī)格: 0.2ml

HSD3B1  滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 規(guī)格: 0.1mlGlutamine PRPP amidotransferase  谷磷酸核糖基焦磷酸酰胺基轉(zhuǎn)移 規(guī)格: 0.2ml

PIWIL4  piwi樣4蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Histone H1  組蛋白H1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CXorf36  脫羧蛋白體36抗體 規(guī)格: 0.2ml

GFP  綠色熒光蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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