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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | ATF2 Phospho-Ser112 or 94 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規(guī)格 | 50μl |
貨號 | BK-S64508 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規(guī)則:
SW1116(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)番瀉苷D(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Sennoside D
小鼠肺腺癌細胞系;LA795二氫辣椒堿(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Dihydrocapsaicin
人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 )五味子酯乙(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Schizandrol B
CM-R120大鼠角膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL柴胡皂苷B1(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品SaikosaponinB1
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1 小鼠成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL番茄堿(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Tomatidine
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 骨髓瘤細胞,P3X63Ag8.653細胞 RN-c細胞,大鼠皮層神經元細胞殺螟丹(標準品)Aramite質量規(guī)格:分析標準品,99%
人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution質量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照) Amberlite?IRA402 強堿型陰離子交換樹脂(氯型)Amberlite? IRA402質量規(guī)格:氯型
腦動脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)Amberlite® XAD1180N質量規(guī)格:粒徑0.350 - 0.600 mm
CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 嘧菌酯(標準品)Azoxystrobin質量規(guī)格:分析標準品
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十七烷容量:保存:-20℃500毫克
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)無水錄化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2
QG-56細胞,人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用試劑
Saos-2(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7容量:RT5克
Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844
ATF2 Phospho-Ser112 or 94 AntibodyMuM-2B細胞,人眼脈絡色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide質量規(guī)格:美國進口
趨化因子3-O- 4-羥基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol質量規(guī)格:美國進口
LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3質量規(guī)格:美國進口
小耳豬肺細胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4質量規(guī)格:美國進口
人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Sulfate質量規(guī)格:美國進口
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