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簡要描述:馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法及公司相關(guān)產(chǎn)品環(huán)1酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Cyclophosphamide 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit 96T/48T HumaalinELISA試劑盒人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T質(zhì)量規(guī)
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產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T
產(chǎn)品貨號:BK-P97218
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
加巴噴丁-內(nèi)酰胺質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Gabapentin-lactam ratEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠3-硝基酪氨酸(3-)試劑盒 Rat 3-niotyrosine,3- ELISA Kit
加巴噴丁相關(guān)化合物B質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Gabapentin Related Compound B 小鼠CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒 ,英文名: CD5L ELISA Kit CLIAKitforS-10
堿性成纖維生長因子bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 10倍TBS濃縮緩沖溶液100毫升 腮腺炎病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
頭孢他啶-d5Ceftazidime-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 MouseClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISA試劑盒人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Δ2-頭孢他啶Δ2-Ceftazidime質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 小鼠血管生長素(ANG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ELISAKitPF-3小鼠血小板因子3規(guī)格:48T/96T
頭孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Rat calcium / calmodulin depende protein kinase 2 (CAMK 2) ELISA Kit 大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒 Humancholineacetylase,CHAcELISAKit人膽堿乙?;?/span>(CHAc)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1β-促激素,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRβ-MSH, human
Z-HL16C細(xì)胞,人胚肺成纖維細(xì)胞突變癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-6細(xì)胞 CL-0074DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2β-促激素,猴質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRβ-MSH, monkey
SW620(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Ac-垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAc-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)
HPAEC-c 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Ac-YVAD-肽核酸質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAc-YVAD-pNA
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)β-丙內(nèi)酯(>95.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)β-Propiolactone
馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法Hep 3B2.1-7人肝癌細(xì)胞 Hep 3B2.1-7 human hepatocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS花寶3號,英文名或英文縮寫:N-P-K,級別:生物技術(shù)級,95%,規(guī)格:1毫克
血小板衍生生長因子2-1單聚物 2-Vinylpyridinq
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 (HPAF)( 5×105 ) RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞 RattusTRIS,1.0MSTERILESOLUTION,pH7.0TRIS無菌溶液生物技術(shù)級透明無色液體RTsigma
犬
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
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