當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
簡要描述:尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品角膜內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 100小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記) 人肺腺癌細胞,SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞 LLC Lewis(肺癌細胞)
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
Related Articles詳細介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P97069
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量:
內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
無脂肪酸牛血清白蛋白 Albumin, from bovine Fatty free 物理性狀及指標: 外觀:……………………凍干粉
小鼠IgG;免疫球蛋白(小鼠) IgG from mouse serum 產(chǎn)品簡介:小鼠免疫球蛋白(IgG)廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)及分子生物學(xué)中各個分支學(xué)科的研究領(lǐng)域,它即可作為大分子球蛋白用于生物化學(xué)的研究,也可以作為抗原用于免疫學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)之中。 純度:SDS-PAGE,90%以上;
氧合血紅蛋白 Oxyhemoglobin from Human Erythr
己二醇(>98%,BR) Hexylene glycol 分子式:CH3CH(OH)CH2C(CH3)2OH 分子量:118.17
甲亞胺鹽;偶氮甲堿H Azomethine-H monosodium salt 分子式:C17H12NO8S2Na•xH2O 分子量:445.4
間羥基肉桂酸(>98%,BR) 3-Hydroxycinnamic acid 分子式:HOC6H4CH=CHCO2H 分子量:164.16
堿式碳酸鎂五水 Magnesium carbonate basic pentahydrate 分子式: Cl2Mg2O 分子量:135.52
堿式碳酸(>99%,BR) Lead(II) carbonate basic 分子式:(PbCO3)2•Pb(OH)2 分子量:775.63
50毫升 HumanCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
殘留溶劑第1類(特殊運輸)NA 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硼酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃25毫克 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒 Mouse Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA kit
馬尿酸 Hippuric acid,98% 495-69-2 5G 通用試劑 嗜肺軍團桿菌(LP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
炳烯醋異丁酯 Isobutyl ccrylctq 106-63-8 HumanPseudomonasExotoxinA,PEAELISA試劑盒人綠膿桿菌外毒素A(PEA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒氧化鍺shēng huà shì jì容量:RT25克 豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit
128-53-0N-乙基順二;N-乙基失水蘋果;N-乙基馬來N-etxylMaleiMide;NEM; Humancytotoxin,CTXELISAKit 人細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
PROCASPASE-3ACTIVATORPROCASPASE-3 活化劑1
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號24棟 技術(shù)支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼