注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
?
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

人胰島細(xì)胞抗體(ICA)Elisa 試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素自身抗體(IAA)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素原(PI)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素受體β(ISR-β)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島素(INS)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA  試劑盒 96T/48T 試劑盒

擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格磷酸化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：phospho-CstF64 (Ser83)

核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：RUNX2

衰變加速因子CD55抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CD55

1號(hào)染色體開放閱讀框170抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C1orf170

CGG結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CGGBP1

鈣結(jié)合蛋白D28K抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：Calbindin

鈣粘蛋白23抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：Cadherin like 23

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CCDC98

3號(hào)染色體開放閱讀框33抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C3orf33

CD34抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CD34

細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CXCR5

γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：CXCL9/MIG

緊密連接蛋白16抗體 規(guī)格： 0.1ml  英文名稱：Claudin 16

7號(hào)染色體開放閱讀框34抗體 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：C7orf34

細(xì)胞色素P4504A22抗體（脂肪酸Ω羥化酶） 規(guī)格： 0.2ml  英文名稱：CYP4A22

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。